產(chǎn)品型號:BC1280-50T/24S
更新時間:2025-08-28
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪 問 量 :1189
010-50973130
產(chǎn)品分類
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可見分光光度法
注意:本產(chǎn)品試劑有所變動,請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號:BC1280
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一 | 液體3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑二 | 液體40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑三 | 液體10 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 液體140 μL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品:臨用前取102 μL加入898μL蒸餾水得到1mol/L(即1000μmol/mL)的過氧化*溶液,2-8℃保存4周。
2. 0.25μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:取10μL 1000μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液和990μL蒸餾水混合配成10μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液;再取25μL 10μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液和975μL蒸餾水混合配成0.25μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
產(chǎn)品說明:
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物(腸黏膜、肺、肝臟、腎臟等)、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛,其活性與核酸和蛋白質(zhì)合成密切相關(guān),能夠反映腸道機(jī)械屏障的完整性和受損程度。
DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫,H2O2氧化亞鐵*中的Fe2+生成Fe3+,F(xiàn)e3+進(jìn)一步與4-氨基安替 林和酚反應(yīng)生成紅色醌類化合物,在505nm處有特征吸收峰,通過測定505nm處的吸光值來計算DAO的活性
.
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
稱取0.1009g竹葉樣本,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿,10000g 4℃離心20min,取上清置冰上待測,之后按照測定步驟,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=1.553-0.638=0.915,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.353-0.059=0.294;按樣本質(zhì)量計算酶活得:DAO活性(U/g 質(zhì)量) = 0.25×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×F =7.711 U/g 質(zhì)量
稱取0.1000g十二指腸樣本,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿,10000g 4℃離心20min,取上清置冰上待測,之后按照測定步驟,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.363-0.251=0.112,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.353-0.059=0.294;按樣本質(zhì)量計算酶活得:DAO活性(U/g 質(zhì)量) = 0.25×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W×F =0.952 U/g 質(zhì)量
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